|
Цистеин из
шерсти
Цистеин содержится во многих белках, из которых получается гидролизом.
Однако только кератины дают достаточно высокий выход цистеина, поэтому
сырьем для его получения служат волосы, шерсть, перья, рог и др.
|
__________________________________________________
Сырьё и реактивы:
сырая овечья шерсть............. 200 г
соляная кислота (20-процентная)...... 400 мл
ацетат натрия ................ 200 г
активный уголь, едкий натр, сульфат меди.
__________________________________________________
|
|
Сырую овечью шерсть освобождают от механических
загрязнений, промывают слегка теплым мыльным раствором, тщательно
прополаскивают дистиллированной водой и просушивают. 200 г
подготовленной шерсти помещают в двухлитровую круглодонную колбу,
заливают 400 мл 20-% соляной кислоты и, снабдив колбу обратным
холодильником, проводят гидролиз, нагревая смесь 5—6 часов на сетке до
равномерного кипения. Процесс считают законченным, когда проба
гидролизата покажет отрицательную биуретовую реакцию (см. примечание).
Горячую массу фильтруют, отсасывая, остаток на фильтре промывают
дистиллированной водой. В фильтрат, объединенный с промывными водами,
добавляют кристаллический ацетат натрия до тех пор, пока проба на
минеральную кислоту (по конго) не станет отрицательной. Уксуснокислый
раствор оставляют на двое суток в холодильнике для кристаллизации
цистеина. Выпавшие кристаллы отсасывают. Чтобы очистить сырой цистеин
от пигментов, его растворяют в возможно малом количестве кипящей
3-процентной соляной кислоты и повторным кипячением с новыми порциями
активного угля полностью обесцвечивают (требуется от 2 до 5 обработок
каждый раз с 2 г угля). Бесцветный или слегка желтоватый раствор
фильтруют горячим через складчатый фильтр и добавляют профильтрованный
насыщенный раствор ацетата натрия (40—50 г) до отрицательной реакции на
конго. По мере охлаждения начинает кристаллизоваться цистеин. Через 5—6
часов его отфильтровывают, отсасывая, и дважды промывают горячей водой
(для удаления остатков тирозина). Выход около 5 г; т. пл. 258—161°; [α]20
= -224° (в 11-процентной соляной кислоте). Ртутная
соль цистеина. Реактив приготавливают растворением 0,1 г
окиси ртути в 0,4 г концентрированной серной кислоты и 2 мл воды.
Щелочной раствор цистеина подкисляют уксусной кислотой и прибавляют
реактив. Выпадает белый осадок ртутной соли цистеина. Примечание. Небольшое количество
гидролизата сильно подщелачивают едким натром и добавляют 2—3 капли
1-процентного раствора сульфата меди; появления фиолетовой окраска не
должно наблюдаться.
|
